实验原理是通过脂类染料（如苏丹黑或油红O）对血清脂蛋白进行预染。随后，将经过预染的血清置于琼脂糖凝胶板上进行电泳分离。在通电后，脂蛋白会朝正极方向移动，并分为多个不同的区带。

试剂与器材

1. 巴比缓冲液（pH 8.6，离子强度 0.075）：作为电极缓冲液，配方为巴比/妥钠 154 g，巴比/妥 276 g，EDTA酸 0.292 g，溶解于水并加水至 1000 ml。
2. 三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH 8.6）：作为凝胶缓冲液，配方为三甲基氨基甲烷 12.12 g，EDTA酸 0.29 g，NaCl 15.85 g，溶解于水并加水至 1000 ml。
3. 琼脂糖凝胶：琼脂糖 0.45 g，三羟甲基氨基甲烷缓冲液 50 ml，水 50 ml，加热至沸腾，待琼脂糖充分溶解后立即停止加热。
4. 挖槽工具：制作切口刀，其刀片长 15 mm，由有机玻璃或木片固定，间距为 15 mm；挖槽小匙，用直径 15 mm 的铜丝约 6 cm 长，一端锤成扁平，用砂纸磨光。
5. 电泳槽和电泳仪：与血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳使用的仪器相同。

操作步骤

1. 预染血清：将 0.2 ml 血清与 0.2 ml 苏丹黑染色液混合于小试管中，在 37℃水浴中染色 30 分钟，然后以 2000 转/分离心约 5 分钟。
2. 制备琼脂糖凝胶板：将已配制的 0.45% 琼脂糖凝胶于沸水浴中融化，用吸管注入载玻片，每片 25 ml，静置约半小时待其凝固。
3. 加血清：凝固好的琼脂糖凝胶板一端约 2 cm 处，用切口刀垂直切入凝胶后立即取出。用铜丝小匙将小条凝胶取出，轻轻用滤纸吸干小槽中水分，随后用血色素吸管吸取约 15 μl 预染血清，注入小槽内。
4. 电泳：将加过血清的凝胶板平行放入电泳槽中，样品应位于阴极一端。两块三层纱布浸润于巴比/妥缓冲液中，贴于凝胶板两端。确保纱布另一端浸于电泳槽内的巴比/妥缓冲液中（注意：电极缓冲液不可用三羟甲基羟基氨基甲烷替代）。接通电源，电压设定为 120~130V，每片电流为 3~4mA。经过电泳约 15 至 55 分钟后，即可观察到分离出的色带。

注意事项

1. 电泳样品应为新鲜的空腹血清。
2. 每块凝胶可平行挖两条小槽，以便加两个样品。
3. 如使用相同形状和小槽大小的有机玻璃片，固定于适当位置后，待琼脂糖凝固取出有机玻璃片，将保留小槽，便于直接加样。
4. 若需保存电泳样本，将电泳后的凝胶板（与玻片一起）浸泡于清水中脱盐 2 小时，随后在大约 80℃的烘箱中烘干。

结果及临床意义

1. 正常人血清脂蛋白可观察到三条区带，从负极到正极依次为 β-脂蛋白（最深）、前β-脂蛋白（最浅）、α-脂蛋白（比前β-脂蛋白稍深一些），原点处无乳糜微粒。
2. 若前β-脂蛋白颜色深于α-脂蛋白，并结合血清甘油三脂显著升高且胆固醇正常或略高，则可诊断为Ⅳ型高脂蛋白血症。
3. 若β-脂蛋白区带明显加深，同时伴随血清总胆固醇增高，甘油三脂正常者为Ⅱa型；而若血清总胆固醇增高，而甘油三脂略高的前β溶解现象，则为Ⅱb型。
4. 若β-和前β-两区带无法分离，连在一起称为“宽β区带”，且结合血清甘油三脂和胆固醇均增高，则可诊断为Ⅲ型。
5. 若在原点出现乳糜微粒，而β和前β均正常或降低，并且血清甘油三脂显著升高，则可诊断为Ⅰ型。

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